BSC-1000ⅡB2 生物安全柜 《使用章程及日常維護(hù)》

生物安全柜原理

生物安全柜（Biological safety cabinets，BSCs）是為操作原代培養(yǎng)物、菌毒株以及診斷性標(biāo)本等具有感染性的實(shí)驗(yàn)材料時，用來保護(hù)操作者本人、實(shí)驗(yàn)室環(huán)境以及實(shí)驗(yàn)材料，使其避免暴露于上述操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設(shè)計(jì)的。當(dāng)操作液體或半流體，例如搖動、傾注、攪拌，或?qū)⒁后w滴加到固體表面上或另一種液體中時，均有可能產(chǎn)生氣溶膠。在對瓊脂板劃線接種、用吸管接種細(xì)胞培養(yǎng)瓶、采用多道加樣器將感染性試劑的混懸液轉(zhuǎn)移到微量培養(yǎng)板中、對感染性物質(zhì)進(jìn)行勻漿及渦旋振蕩、對感染性液體進(jìn)行離心以及進(jìn)行動物操作時，這些實(shí)驗(yàn)室操作都可能產(chǎn)生感染性氣溶膠。由于肉眼無法看到直徑小于5μm的氣溶膠以及直徑為5～100μm的微小液滴，因此實(shí)驗(yàn)室工作人員通常意識不到有這樣大小的顆粒在生成，并可能吸入或交叉污染工作臺面的其他材料。已經(jīng)表明，正確使用生物安全柜可以有效減少由于氣溶膠暴露所造成的實(shí)驗(yàn)室感染以及培養(yǎng)物交叉污染。生物安全柜同時也能保護(hù)環(huán)境。

多年以來，生物安全柜的基本設(shè)計(jì)已經(jīng)歷了多次改進(jìn)。主要的變化是在排風(fēng)系統(tǒng)增加了HEPA過濾器。對于直徑0．3μm的顆粒，HEPA過濾器可以截留99．97%，而對于更大或更小的顆粒則可以截留99．99%。HEPA過濾器的這種特性使得它能夠有效地截留所有已知傳染因子，并確保從安全柜中排出的是*不含微生物的空氣。生物安全柜設(shè)計(jì)中的第二個改進(jìn)是將經(jīng)HEPA過濾的空氣輸送到工作臺面上，從而保護(hù)工作臺面上的物品不受污染。這一特點(diǎn)通常被稱為實(shí)驗(yàn)對象保護(hù)（product protection）。這些基本設(shè)計(jì)上的變化使得生物安全柜都得到了改進(jìn)。

生物安全柜的操作規(guī)程

1、 向所有可能使用生物安全柜的用戶解釋安全柜的使用及限制條件。應(yīng)發(fā)給工作人員操作手冊。特別是必須明確告訴工作人員，在出現(xiàn)濺灑、破碎、方法不當(dāng)?shù)那闆r下，安全柜無法保護(hù)操作人員。

2、 安全柜只有在工作正常時才能使用。

3、 安全柜前臉的玻璃觀察窗不得在安全柜處使用狀態(tài)時打開。

4、 柜內(nèi)放置的儀器和材料必須保持在**低數(shù)量。靜壓箱后部的空氣循環(huán)不得受阻。將材料放入安全柜的工作區(qū)之前，應(yīng)對其表面進(jìn)行去污處理。

5、 柜內(nèi)不得使用本生燈（一種煤氣燈），因其產(chǎn)生的熱會干擾氣流并可能損壞過濾器。可以使用微型電焚燒爐，但使用一次性滅菌環(huán)則更好。

6、 柜內(nèi)所有的工作要在工作面的中部或后部進(jìn)行，并能從觀察面板中看到。

7、 操作手后方的活動要達(dá)到**少。

8、 操作手不應(yīng)將手臂來回伸進(jìn)出柜子，以免干擾氣流。

9、 前送風(fēng)格柵不得被便簽、滴管、或其他材料堵住，否則會干擾氣流從而可能使材料受到污染，使人員處在暴露狀態(tài)。

10、應(yīng)在每次工作完成后及**結(jié)束時，使用合適的消毒劑清潔安全柜的表面

11、柜子的風(fēng)扇在工作開始前和工作完成后要再各運(yùn)行5分鐘。

生物安全柜的清潔與消毒

生物安全柜內(nèi)的所有物品，包括設(shè)備，都應(yīng)在工作完成之后進(jìn)行表面去污處理并從柜內(nèi)取出，因?yàn)闅埩舻呐囵B(yǎng)介質(zhì)可能會提供微生物的生長條件。安全柜的內(nèi)表面應(yīng)在每次使用前與使用后進(jìn)行去污處理。要用消毒劑擦拭工作臺表面及內(nèi)壁面，使用的消毒劑應(yīng)能殺死柜內(nèi)可能存在的所有微生物。**工作結(jié)束時，應(yīng)進(jìn)行**后表面去污處理，即對工作臺、各個側(cè)面、背面及玻璃的里面進(jìn)行全面擦拭。可以使用漂白粉液或70%酒精，這種對目標(biāo)生物有效的消毒劑。如使用漂白粉液這種有腐蝕性的消毒劑，則要用滅菌水進(jìn)行二次擦拭。建議工作柜在清潔、消毒時處在工作狀態(tài)。如果其未處在工作狀態(tài)，則應(yīng)運(yùn)行5分鐘，以便在安全柜關(guān)閉前將其中的氣體清除掉。

生物安全柜的去污處理

對II級生物安全柜的去污，是將適量的低聚甲醛（使柜內(nèi)空氣中的低聚甲醛的**終濃度為80%）置于電熱盤或煎鍋上（從柜外控制）。另將一個放有比低聚甲醛多10%的碳酸氫的電熱盤或煎鍋也放在柜內(nèi)（在柜外控制）。這第二個容器上應(yīng)帶蓋，這個蓋子可以從遠(yuǎn)處取下來（例如系在一根線上，線可以從柜外拉動）。這樣可以使提前中和的低聚甲醛達(dá)到**小。如果相對溫度低于70%，有熱水的開口容器。如果沒有前隔板，則要用生型塑料擋板，將其用膠帶粘在前臉，確保不會有氣體漏入房間。當(dāng)盤內(nèi)的低聚甲醛已全部揮發(fā)或開關(guān)已打開1小時后，將開關(guān)關(guān)閉。將安全柜放置一整晚不得觸動。然后將第二個盤子的蓋移開并打開其開關(guān)，碳酸氫氨開始揮發(fā)。這時，關(guān)閉盤子的開關(guān)，讓安全柜開始工作，使碳酸氫氨氣循環(huán)1小時。然后可以取下前隔板（或塑料擋板），安全柜即可使用。

操作者

生物安全柜如果使用不當(dāng)，其防護(hù)作用就可能大大受到影響。操作者在移動雙臂進(jìn)出安全柜時，需要小心維持前面開口處氣流的完整性，雙臂應(yīng)該垂直地緩慢進(jìn)出前面的開口。手和雙臂伸入到生物安全柜中等待大約一分鐘，以使安全柜調(diào)整完畢并且讓里面的空氣“掃過”手和雙臂的表面以后，才可以開始對物品進(jìn)行處理。要在開始實(shí)驗(yàn)之前將所有必需的物品置于安全柜內(nèi)，以盡可能減少雙臂進(jìn)出前面開口的次數(shù)。#p#分頁標(biāo)題#e#

物品放置

Ⅱ級生物安全柜前面的進(jìn)氣格柵不能被紙、儀器設(shè)備或其他物品阻擋。放入安全柜內(nèi)的物品應(yīng)采用70%酒精來清除表面污染。可以在消毒劑浸濕的毛巾上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以吸收可能濺出的液滴。所有物品應(yīng)盡可能地放在工作臺后部靠近工作臺后緣的位置，并使其在操作中不會阻擋后部格柵。可產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備（例如混勻器、離心機(jī)等）應(yīng)靠近安全柜的后部放置。像有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤子以及吸濾瓶等體積較大的物品，應(yīng)該放在安全柜內(nèi)的某一側(cè)。在工作臺面上的實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)該按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進(jìn)行。

耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤不應(yīng)放在安全柜的外面，否則在使用這些物品時雙臂就必須頻繁進(jìn)出安全柜，這樣會干擾安全柜空氣屏障的完整性，從而影響對人員和物品的防護(hù)。

明火

在生物安全柜內(nèi)所形成的幾乎沒有微生物的環(huán)境中，應(yīng)避免使用明火。使用明火會對氣流產(chǎn)生影響，并且在處理揮發(fā)性物品和易燃物品時，也易造成危險。在對接種環(huán)進(jìn)行滅菌時，可以使用微型燃燒器或電爐，而不應(yīng)使用明火。

溢出

實(shí)驗(yàn)室中要張貼如何處理溢出物的實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)則，每一位使用實(shí)驗(yàn)室的成員都要閱讀并理解這些規(guī)程。一旦在生物安全柜中發(fā)生有生物學(xué)危害的物品溢出時，應(yīng)在安全柜處于工作狀態(tài)下立即進(jìn)行清理。要使用有效的消毒劑，并在處理過程中盡可能減少氣溶膠的生成。所有接觸溢出物品的材料都要進(jìn)行消毒和／或高壓滅菌。

個體防護(hù)裝備

在使用生物安全柜時應(yīng)穿著個體防護(hù)服。在進(jìn)行一級和生物安全水平的操作時，可穿著普通實(shí)驗(yàn)服。前面加固處理的反背式實(shí)驗(yàn)隔離衣具有更好的防護(hù)效果，應(yīng)在進(jìn)行三級和四級生物安全水平（防護(hù)服型實(shí)驗(yàn)室除外）的操作時使用。手套應(yīng)套在隔離衣的外面，可以戴加有松緊帶的套袖來保護(hù)研究人員的手腕。有些操作可能還需要戴口罩和安全眼鏡。

常見故障

窗式警報器只能裝在帶有滑動窗的安全柜上。發(fā)出警報時表明操作者將滑動窗移到了不當(dāng)?shù)奈恢谩Ｌ幚磉@種警報時，只要將滑動窗移到適宜的位置就可以了。氣流警報器報警時，表明安全柜的正常氣流模式受到了干擾，操作者或物品當(dāng)即處于危險狀態(tài)。當(dāng)氣流警報響起時，應(yīng)立刻停止工作。

易損件

   生物安全柜主要及重要的消耗品為排風(fēng)HEPA過濾器、送風(fēng)HEPA過濾器。